烟草品种抗病性鉴定中华人民共和国烟草行业标准（YC/T 41-1996），国家烟草专卖局于1996年4月3日发布，1996年6月1日实施。

　　1.  范围

　　
　　本标准规定了由真菌、细菌、根结线虫引起的烟草根茎病害的抗性测定，致病性分化鉴定方法，以及烟草品种对病毒病抗性测定的方法。

　　
　　本标准适用于室内和田间进行烟草抗烟草根茎病害，烟草病毒病的筛选和抗性鉴定。

　　2.  引用标准

　　
　　下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。

　　
　　YC/T 39-1996 烟草病害分级及调查方法。

　　3.  定义

　　
　　本标准采用下列定义。

　　
　　致病性分化 variation of pathogenically

　　
　　病原菌由于突变、杂交、适应性变异，不同孢子细胞质的异质性致使生理小种的改变，导致致病性差异。

　　4.  品种抗病性鉴定

　　1.  烟草黑胫病(Black shank)

 

　　1.  病圃鉴定

　　1.  方法

　　
　　品种抗病性的测定大多数是利用有病株连作烟田作病圃,诱其自然发病的方法,也可进行人工辅助接种。将苗龄50~60天的烟苗移至病圃,每个品种种植1行,不得少于三次重复,随机排列或顺序排列,每行20株以上,50行设抗病品种革新三号,中抗品种金星6007,感病品种设小黄金1025各一行为对照。另设当地种植的抗、中、感品种做辅助对照,若人工辅助接菌,烟草移至大田成活后(约10~20天)用菌谷接种（每株接种量视病地而异，新病地4g左右，老病地2~3g），接种后天气干旱要灌水，使田间土壤含水量处于饱和状态。

 

　　菌谷制作方法：将谷子煮至约一半谷粒开花捞出，装入三角瓶，高压灭菌1h。将已培养好的黑胫病菌种，接种到灭菌后冷却的谷子上，然后置于28~30℃下培养10~14天，即成。

　　2.  分级与调查方法

　　
　　病害严重度分级应符合YC/T 39的规定。

　　
　　调查时间：自然发病于病发初期、盛期和未期各调查一次，若人工接种则于接种后第20天、40天、60天各调查一次。每次均应调查各品种全部植株。

　　2.  室内接种鉴定

　　
　　将苗龄40天左右的烟苗，移栽至直径20cm的花盆，每盆2株。也可不移栽，但留苗不可太密，株距5cm左右，待烟苗成活后，每株按0.25~0.5g菌谷量接种,置于28℃左右条件下诱发病害发生。接种后第3、5、7、10天后调查病性(病害严重度分级按YC/T 39的规定,计算发病率和病情指数)。

　　3.  致病性分化

　　1.  测定方法

　　

　　选择苗龄40天左右的L8、N.C1071、N.nesophila、N.nudicaulis、DC202或A23、WS117和小黄金1025，将制备好的黑胫病菌谷每株按0.5 g进行土壤接种，或用孢子悬浮液（1000孢子数/ml）进行茎注射接种，观察各品种间的抗病性差异。病害严重度分级应符合YC/T 39的规定。

孢子悬浮液制备：将培养好的黑胫病菌，每管加入9ml无菌水，1ml1‰硝酸钾溶液，然后置于冰箱（10℃左右）24h后取出，加无菌水制成。

表1 0，1，2，3号黑胫病生理小种在鉴别寄主上反应

小种品种	0  1  2   3		小种品种	0 1 2 3
L8 C1071 N.nesophila	R  S  R   M R  S  -   R S  R   -  R		N.nudicaulis DC202或A23 WS117	R S - M S S R S S S - R
注：R-抗病，病情指数25以下；S-感病，病情指数75以上；M-中感病或中抗，26~50中抗，51~75中感。